1、整体的一个无菌室应当保持清洁与整齐，在无菌室内仅仅存放必定需要的试验用具（如酒精灯、酒精棉、打火机、镊子、接种针、接种环、记号笔等）。不可以在无菌室内存放与检测无关的任意物品。

2、无菌室内的工作台、门、窗、桌、椅及地面，需要用75%酒精进行擦拭，随后使用75%酒精的喷雾进行消毒空气，最后还需要使用臭氧杀菌1小时。

3、需要定期的检查室内空气的无菌状况是否符合要求，细菌数应该限制在10个以下，在发觉不符合相关要求时，应该立即展开行动，进行彻底的消毒灭菌。

4、在无菌室进行杀菌工作之前，要将全部物品放置在需要操作的地方(待检物例外)，随后翻开紫外灯，进行30分钟的杀菌，达到时间之后，关闭紫外灯以待使用。

5、在进入无菌室之前，必须在缓冲间内更换好工作服、工作鞋。

6、所以的操作，都应该严格遵照无菌操作规定进行，在进行相关操作时，要少说话不喧哗，以便保持整体环境的无菌状态。

7、火焰灭菌:像接种针、接种环等这样的试验用具，可以直接使用火焰灭菌。

8、一般消毒:无菌室内的凳子、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装，这些都无法进行灭菌,必须使用其他方法才能进行消毒处理,需要75%酒精，来进行擦拭消毒，并且工作人员的手同样是使用75%酒精来进行消毒。

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